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2-Real-time metabolism assays

 

PRÉSENTATION

Les analyseurs Seahorse de chez Agilent mesurent en temps réel le taux de consommation en oxygène (OCR) et le taux d’acidification du milieu extracellulaire (ECAR) des cellules vivantes en plaque de 8, 24 ou 96 puits.   Les taux OCR et ECAR sont des indicateurs clés de la respiration mitochondriale et de la glycolyse ainsi que du taux de production d’ATP. Le système d’injection à quatre ports avec mix automatique permet d'analyser en temps réel la réponse de cellules vivantes à différents substrats, inhibiteurs et autres composés. Ainsi, des tests métaboliques standards sont proposés, comme la mesure du taux de production d’ATP, un test de stress mitochondrial, un test de stress de la glycolyse…. Le système de contrôle de la température autorise aussi des études sur une grande variété d'échantillons cellulaires.

L'analyseur Seahorse XF HS Mini de chez Agilent mesure en temps réel les taux OCR et ECAR des cellules vivantes en quantité limitée en plaque 8 puits. Un nouveau design permet de concentrer les cellules à analyser au centre des puits offrant ainsi une meilleure sensibilité des mesures avec très peu de cellules. Cet équipement permet également de réaliser des mesures en milieu confiné.

Le format en plaque de 24 puits permet d'analyser des échantillons plus importants et/ou métaboliquement très actifs. Les mesures de la fonction métabolique peuvent ainsi être réalisées sur des cellules en culture, des échantillons ex-vivo (tissus, îlots, biopsie..) et de petits organismes  (nématodes, embryons de poissons zèbres, drosophiles...).

Le format en plaque de 96 puits permet d'analyser de nombreuses conditions expérimentales en une seule fois, pour une conception flexible des tests à réaliser, pour effectuer des études dose-réponse ou encore réaliser du criblage cellulaire.  Les mesures de la fonction métabolique peuvent être réalisées sur des lignées cellulaires ou des cellules primaires, adhérentes ou en suspension, mais aussi sur des mitochondries isolées.

Le lecteur multimode de microplaque Cytation 1 de Biotek associe de l'imagerie cellulaire en champ clair à de la détection quantitative en fluorescence. Le module de détection multimode est doté d’une fluorescence à filtre haute sensibilité et d’un monochromateur pour l’absorbance UV-Vis. L'appareil est doté d'un contrôle de la température. Une solution intégrée avec les analyseurs Seahorse 24 et 96 est proposée, permettant la combinaison de l’analyse cellulaire et de l’imagerie quantitative de façon intuitive pour normaliser les données et rationaliser leur interprétation. 

 

ACTIVITÉS

Le service dispose d'une tarification différentielle et est ouvert à toute la communauté scientifique académique et industrielle.

Différents niveaux de prestations sont proposés : mise à disposition d'équipements avec ou sans assistance, prestations de service sur devis et après étude de faisabilité. Tous les consommables sont fournis. Le service apporte également ses conseils et son aide pour la mise en place de projets, l’adaptation de la technologie à un contexte particulier, l’analyse des données et l’interprétation des résultats.

La mise à disposition régulière des instruments requiert une formation gratuite mais obligatoire. Tout nouvel utilisateur s’engageant à accepter les conditions générales d’utilisation du service aura alors accès au planning de réservation en ligne.

 

ÉQUIPEMENTS

Seahorse XF HS mini (8 puits)

Seahorse XFe24 (24 puits),

Seahorse XFe96 (96 puits)

Cytation 1

 

 

CONTACT / LOCALISATION

Pour tout renseignement, merci de contacter 

Laurence Canaple : immos-sfrbiosciences.lyon@inserm.fr

Localisation :

ENS de Lyon, site Monod, 46 allée d'Italie, 69364 Lyon 7 - mise à disposition d’un Seahorse XFe24 (24 puits), d’un Seahorse XFe96 (96 puits), d’un lecteur d’imagerie cellulaire Cytation1 et d’un laboratoire L2 tout équipé

mise à disposition d’un Seahorse XF HS mini (8 puits) au 50 avenue Tony Garnier 69007 Lyon, Btaiment R.Franklin (UCBL)

 

INFORMATIONS PRATIQUES / DOCUMENTATION / AUTRE

Les analyseurs Seahorse sont accessibles par demi-journée (8h-13h ou 13h-18h).

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